Osobe čija je ishrana dobro izbalansirana retko imaju problem sa nedostatkom vitamina B2. Međutim, kod starijih osoba i alkoholičara postoji rizik za pojavu manjka ovog vitamina. Kao glavni simptomi nedostatka, javljaju se probavne tegobe, umor, usporeni rast, ranice u uglovima usana, otečenost jezika, bol u grlu, zamor očiju i/ili osetljivost na svetlost. Riboflavin se generalno smatra bezbednim, čak i u većim dozama, budući da se ovaj vitamin ne skladišti u telu, već se izlučuje preko urina. Međutim, u slučaju unosa većih doza (npr. preko suplemenata vitamina B2 koji obično sadrže 25 do 100 mg ovog vitamina) može se javiti žuta ili narandžasta boja urina, osetljivost na svestlost, osećaj svraba i peckanja.